凯氏定氮法的操作

1 、样品处理：精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品（约相当氮30-40mg） ，移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中
，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20毫升硫酸 ，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上
，小火加热，待内容物全部炭化 ，泡沫完全停止后
，加强火力，并保持瓶内液体微沸 ，至液体呈蓝绿色澄清透明后
，再继续加热0.5小时 。取下放冷，小心加20ml水 ，放冷后
，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶 ，洗液并入容量瓶中
，再加水至刻度，混匀备用
。取与处理样品相同量的硫酸铜
、硫酸钾、浓硫酸同一方法做试剂空白试验。但是此法比较危险 ，不易在实验室演示，大多数实验室有消煮仪一次可以进行多个（一次可以消煮16个样品）样品处理
，并有通风橱进行通风，温度可以自己设定 ，更加安全和可操作性
，因此逐步成为主要的凯氏定氮法的首选处理方法 。

一般消解温度都设在240度及240度以上，如果想快速消解可以适当提高温度甚至可以用最大温度进行消解。

2 、按图装好定氮装置 ，于水蒸气发生器内装水约2/3处加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸
，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸 ，用调压器控制
，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水
。

3、向接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示剂1滴，并使冷凝管的下端插入液面下 ，吸取10.0ml样品消化液由小玻璃杯流入反应室
，并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯 ，提起玻璃塞使其缓慢流入反应室，不能立即将玻璃盖塞紧
，这样易使玻璃塞粘在进样口，应先用蒸馏水冲洗然后再盖 ，并加水于小玻璃杯以防漏气 。夹紧螺旋夹
，开始蒸馏，蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内 ，蒸馏5min
。移动接收瓶
，使冷凝管下端离开液皿，再蒸馏1min ，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶
，以0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液定至灰色或蓝紫色为终点 。

同时吸取10.0ml试剂空白消化液按3操作
。

QSY-I凯氏定氮仪 说明书

一
、概述

凯氏定氮仪是依据经典（凯氏定氮）法设计的自动测氮蒸馏系统，该仪器安装、操作简单；使用安全 、可靠
、省时、省力；自动化程度高 ，适用于粮油检测 、饲料分析
、植物养分测试、土肥检测 、医药
、化工等行业的分析、教学及研究中
，是操作人员的理想工具。

二 、工作原理

根据凯氏定氮原理测定氮需要三个步骤，即消解
、蒸馏、滴定 。凯氏定氮仪可以完成蒸馏过程
。当被测定样品消解完全后 ，上机完成下列化学反应：

（NH4）2SO4 +2NaOH 高温蒸汽 Na2SO4+2H2O+2NH3↑

反应中释放的氨气与水蒸气一起经过冷凝管冷凝后，被收集在装有硼酸吸收液（含混和指示剂）的三角瓶中
，用滴定管进行滴定，根据酸滴定量 ，用下列公式计算含氮量及粗蛋白含量。

1.401× M

含氮量：N（%）= （V—V0）

W

粗蛋白含量：P（%）= N（%）×C

式中：M 标准酸摩尔浓度；

W 样品重量；

V0 空白样滴定标准酸消耗量（毫升）；

V 样品滴定标准酸消耗量（毫升）；

C 粗蛋白转换系数；

三 、设备外型图及说明

（一）设备前视图及说明:

1、 1
、 操作键盘

2、 2 、 电源开关

3
、 3、 冷凝液管

4 、 4
、 三角瓶

5、 5 、 三角瓶托盘

6
、 6、 蒸汽导管

7 、 7
、 消煮管

8、 8 、 消煮管托盘

9、 9
、 接液槽

10、 10 、碱液桶

11
、 11、蒸馏水桶

图一

（二）设备后视图及安装说明：

1 、 1
、 气泵

2、 2 、 放气头

3
、 3、 碱液电磁阀

4 、 4
、 液位器

5、蒸馏器

6 、蒸馏器排水阀门

7、三角瓶托盘配重砣

8
、冷却水入口

9、冷却水出口

10 、蒸馏器排水出口

11
、蒸馏器供水口

12、碱液入口

13 、压缩空气出口（2只）

图二

（三）设备安装图及说明:

1
、安装前的检查

仪器开箱后
，应参照随机所附装箱单核对全部注明的整机及配套附件，并检查是否有所损坏 ，如果有损坏请及时与本中心联系（请保留损坏部件） 。

2、 2 、 操作条件要求

A
、本仪器应避免安装在阳光直射及过冷、过热或潮湿的地方
。

B 、本仪器应安装在离水源和排水池较近的地方
，并有电源插座的工作位置上，供水节门和电源位置距离仪器均不应大于1米 ，以保证操作方便。

C
、供水应符合水压和水温条件要求 。

D、排水池应低于仪器排水口10厘米以下
，保证排水通畅。

E 、电源配置应符合供电要求
。必须接有地线，有单独供电开关和保险装置 ，确保操作者的用电安全!

F、 水选择如下：

1
、使用蒸馏水为佳。

2、使用自来水应保证水质良好
，可直接使用 。但易结水垢，影响加热效率
。

G 、本仪器应安装在远离大的用电设备处 ，工作场地无震动
、无腐蚀性气体、无强电磁场干扰。

图三

1 、 1
、 操作键盘2、碱液桶3 、蒸馏水桶4
、电源开关（含漏电保护器） 5、电源插座 6 、自来水阀门

7
、冷却水入水管8、冷却水出水管

3 、 3、 安装方法:

A
、 A、 按照安装图（图三）所示摆放各种部件，设备要放置平稳 。

B 、 B
、 按图二所示将各管接口接好

（1） （1） 冷却水入口接自来水阀门
，冷却水出口和蒸馏器排水出口分别接上排水管放到水池中，并使之能

够顺利排水
。

（2） （2） 蒸馏器入水口、碱液入口分别接蒸馏水桶 、碱液桶的排液管；压缩空气出口（两个）分别接蒸馏水

桶
、碱液桶的进气管。

C、请专业电工安装交流220V的电源插座 ，同时安装漏电保护器 。

四 、使用操作前的准备工作:

1
、化学试剂的制备

（1） （1） 配制 30%—40%的氢氧化钠溶液
，3-5升加入碱液桶中
。（建议：用35%浓度，溶液在室温变化后不易结晶而堵塞管路）。

（2） （2） 配制甲基红—溴甲酚绿混和指示剂（按行业标准） 。

（3） （3） 配制2%硼酸（H3BO3）溶液：3-5升加入硼酸液桶中 ，再把甲基红—溴甲酚绿混和指示剂与2%硼酸溶液按1：100比例加入硼酸溶液中
，混合均匀
。

（4） （4） 配制盐酸滴定液：浓度根据被测样品的含量而定（一般为0.1-0.05摩尔），浓度需精确标定。

注：消煮样品需备有硫酸（H2SO4）、硫酸铜（CUSO4） 、硫酸钾 （K2SO4） 。

提示：样品量称取0.5-1克加入浓硫酸8ml-10ml ，加入硫酸铜：硫酸钾为1：3的混合物6克。

以上仅供参考
。

2
、 2、 加碱量的调整：新购进的或长期不用的设备在使用前需对加碱量进行调整
，步骤如下。

A 、蒸馏水桶中加入约10升的水，碱液桶中加入氢氧化钠溶液 ，将盖拧紧
，不得有气泄露 。

B、 B
、 接通电源，分别装空消煮管和三角瓶于设备两只托盘上 ，打开电源开关
。等待几分钟后检查两液桶内空气是否充满，若充满时
，液桶即鼓胀。按加碱键，使碱液能够加到消煮管中 ，待加液正常后再按加碱键停止加碱液 。

3、 回收液定量的调整：

三角瓶托盘是一套可上下移动的机械机构
，它由后面的配重砣前后位置确定，当三角瓶内接收液达到一定量时即可自行下落 ，使接收管脱离液面
，而后蒸馏过程停止
。三角瓶内接收液一般为100ml左右（液体量增加蒸馏时间延长）。确定接收液体积的方法是将容量150ml的三角瓶内，加入需要接收的液体量 ，把它放在托盘上
，调整机内配重距离，使托盘能自行落下 。

4 、 蒸馏工作的准备：

打开自来水开关调整给水量 ，使仪器冷凝供水正常
。按蒸馏键
，进入蒸馏工作状态。此时蒸馏器内水位达到标准后开始加热，待有蒸汽产生后（蒸汽导管的出口有气泡产生） ，表明蒸馏正常，再按蒸馏键关闭蒸馏 。

五
、设备的使用操作:

待以上准备工作做完后才能进行以下操作

① 称取样品于消煮管内
，加入硫酸、硫酸铜 、硫酸钾上消煮炉加热消煮，待消煮化解完全后取下冷却 ，而后消煮管内加入10ml蒸馏水稀释样品并释放热量冷却备用
。

② ② 打开仪器电源开关
，气泵开始工作，待两液桶鼓胀后 ，蒸馏器开始自动加水
，此时不要按任何按键；约一分钟左右水位达到设定位置，也可打开设备后盖观察水位器中的水位是否达到两只短探针高度 ，然后才能进行下一步操作（此情况适用于开机时
，如设备连续在工作则无此情况）。

③ 将空三角瓶放在三角瓶托盘上，此时托盘处在高位；把装有样品的消煮管放在消煮管托盘上 ，一定要与上端的橡胶塞装紧 。。

④ 按加碱键加碱液
，达到需要容量后再按加碱键停止加碱，按蒸馏键开始蒸馏状态（如需终止蒸馏状态 ，按复位键即可），待三角瓶中冷凝液达到预定体积量时
，三角瓶托盘落下，设备蜂鸣器发出“嘀嘀”的连续报警声 ，设备再蒸馏约20秒钟后蒸馏停止工作
，蜂鸣器停止报警
。

⑤ 取下三角瓶，用酸滴定管滴定三角瓶中的液体至终点。按含氮量——粗蛋白质含量公式进行计算 ，取得测定结果 。

六
、维护及保养：

1、 1 、 仪器应安装在符合上述安装条件的地方使用
，且通风良好
。仪器内有热源，同时又有计算机工作 ，所以应有良好的散热条件。

2
、 2、 仪器前部液槽中若积有液体请擦净 。

3 、 3
、 长期使用后在加热器上会结有水垢
，影响加热效率，若水垢过厚 ，在关机状态下断电
，可将蒸汽发生器上的一个旋塞，管口插入一个小漏斗 ，注入除垢剂或冰醋酸清洗水垢（也可用稀释后的硫酸）
。清洗后打开机箱内蒸汽发生器排水截门将水排净，并加入清水多次清洗。

4、 4 、 加碱液桶、加酸液桶应定期清理沉淀物并洗净 。

七
、常见故障及排除方法

故障部位 故障现象 故障原因 排除方法

加

碱

部

分 不能加碱 碱液太少
，进液管离开液面 加碱液

碱桶无压力，桶不鼓起 1、碱桶管路或桶盖有漏气或密封不严的地方 密封漏气处或更换管路

2 、气泵漏气或损坏 更换气泵管路或更换新气泵

碱桶有压力 ，但不能加碱 1
、电磁阀电源未接通 断电后检查电磁阀接线

2、电磁阀内部碱结晶堵塞管路 拆开电磁阀底座清洗内部

蒸

馏

部

分 蒸馏过程中蒸馏器加不进水 1 、蒸汽电磁阀未打开或打开不完全 更换新的电磁筏

2
、蒸馏水电磁阀未打开 检查电磁阀电源是否接通
，如无问题则更换新的电磁筏

程序自动运行时出现失控现象 设备周围有较强电磁对处理器造成干扰 按复位键或关电源后从新开机操作